血清冷球蛋白

冷球蛋白和(或)冷纤维蛋白原的测定方法: 采用一支温氏管可鉴定冷沉淀的存在与否.冷球蛋白的测定是将血清加入温氏管内并保持37℃,为测定冷球蛋白和冷纤维蛋白原,另取一支温氏管注满EDTA抗凝血浆,亦保持于37℃. Ⅰ型单克隆冷球蛋白和冷纤维蛋白原在4℃3～18h之内可沉淀出来,混合型冷球蛋白(Ⅰ型或Ⅲ型)常需72h以上.沉淀物可呈絮状、凝胶状或结晶状. 冷球蛋白和冷纤维蛋白原在37℃能重新溶解.沉淀物在37℃不溶解,不能计入测定内.低温沉淀物的定量测定可以采用低温沉淀物比容或采用双缩脲方法测定经洗涤过的沉淀物蛋白的浓度. 冷沉淀的鉴别: 经离心弃去上清液的沉淀用0.9%氯化钠离心和重新悬浮洗涤三次,最后,此沉淀物溶于0.9%的加温氯化钠溶液或缓冲溶液中.经免疫固定电泳,采用特异抗血清如:抗人血清、抗Ig/κ、抗Ig/λ、抗Ig/α-链、抗Ig/μ链和抗Ig/γ-链将沉淀物成分予以鉴定.有一泳道不加抗血清,作为样本空白对照,以确保在冷凝胶的点样处不出现蛋白的沉淀. 附注:为了防止或减少冷球蛋白丢失,采血时首先应预温注射器和试管,然后将血样在37℃放置2h,使血液凝固后再分离.