补体C3测定

1.14±0.27g／L.

先按要求的稀释度计算出稀释液的用量,其中的半量采用缓冲液.抗C3血清用缓冲液稀释后放56℃水浴预温.然后再加等量的、已预温的15.0g/L琼脂,使抗血清的最终稀释度达到要求.按单向免疫扩散法常规浇制含抗C3血清的琼脂板,冷却凝固后打孔(孔径3mm),孔距1.5cm以上.将冷冻干燥的C3参考血清,按规定加入准确量的蒸馏水,充分混匀后,再用0.1g/L硫柳汞生理盐水稀释至500μg/ml,然后稀释.用1∶25,1∶50,1∶75,1∶100四个稀释度抗C3血清制板后,用微量注射器在孔中分别加入上述不同浓度的C3参考血清(每孔中加10μl),经37℃48h保温后,测得沉淀环直径.以沉淀环直径为纵坐标,相应的C3含量的对数为横坐标,初步绘制标准曲线.一般以沉淀环直径在4～8mm所绘制的标准曲线较佳.