间接免疫荧光试验

1. 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度. 2. 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min). 3. 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡. 4. 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖. 5. 立即用荧光显微镜观察.观察标本的特异性荧光强度,一般可用“"表示: (-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;()荧光较弱,但清楚可见;()荧光明亮;( --)荧光闪亮.待检标本特异性荧光染色强度达“"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性.