聚合酶链反应技术

测定Hp无有关毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)得存在.

1材料:标本采自经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎病例,在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份(每例检查前2周停用抗HP药物),分别作PCR及病理切片检查,检测HP. 2研究方法:PCR技术:采用厦门长城生物工程有限公司生产的HPDNAPCR诊断试剂盒,DNA抽提采用水煮沸法,引物为尿素酶基因片段,其核着酸顺序为:引物1为5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT―3',引物2为5'-TTATTACGCTTC―3',扩增产物为456bP,94℃预变性5分钟,94℃30秒,55℃30秒,72℃1分钟共32个循环,72℃延伸5分钟,2%琼脂糖凝胶电电泳20分钟, BE染色在456bp出现条带为阳性, 根据阳性带亮度分别作、定量判断.