血友病甲检查

血友病甲的检查化验所有内源凝血系统的筛选试验均可延长,包括部分凝血活酶时间(PTT)或激活的PTT(APTT),Biggs凝血活酶生成试验(TGT),简易凝血活酶生成试验(sTGT),血浆复钙时间和凝血时间(CT).由于不同试验敏感性差别,在轻型和亚临床型病例可以正常.APTT试验也因试剂组合不同而对FⅧ:C水平存在敏感性差别.凝血酶原时间(PT)凝血酶时间(TT)均正常.出血时间(BT)一般正常,少数可轻度延长.由于硫酸钡吸附或氢氧化铝凝胶吸附的正常血浆含FⅧ:C和FⅪ:C而无FⅨ:C,因而用正常吸附血浆和血清作APTT纠正试验或者:Biggs TGT可以明确血友病甲、乙和FⅪ的缺乏.FⅧ:C的测定可用一期法或二期法,一期法需要无FⅧ基质血浆,而二期法由于操作复杂现已较少使用,FⅧ:C测定由于试剂或操作者熟练程度等原因可有较大的误差.FⅧ抗原(FⅧ:Ag)测定可测定FⅧ蛋白质,有的患者正常或轻度减少而FⅧ:C几乎测不到,说明存在功能异常的FⅧ分子,又称CRM ,有的患者FⅧ:Ag和FⅧ:C均几乎测不到,称为CRM-.FⅧ:C以正常平均水平百分比或每毫升血浆含的单位(U)表示,U等于100%.正常人平均血浆每毫升含FⅧ:C1单位.血友病患者vWF:Ag正常.

由于分子生物学技术迅速发展,虽然大多数实验室尚无条件,但在分子水平诊断血友病已成为可能,并已用于产前诊断和携带者检测.目前可使用间接基因诊断和直接基因诊断的方法.间接诊断方法多用基因连锁分析,需要有先证者,且先证者母亲为该分析位点杂合子.与血友病甲有关基因连锁的多态性遗传标志有3种:①限制性内切酶片段长度多态性(RFLP):国内外使用的多态性位点有BcL Ⅰ,HindⅢ,XbaⅠ,BgLⅠ等.使用单一多肽位点,杂合子检出率都不到50%,因此必须联合使用多个位点才能提高检出率,国外已达到90%以上;②可变数目串联重复顺序(VNTR)由于人类基因组含一些不同核苷酸重复顺序,这些串联重复顺序拷贝数不同,也可导致DNA限制性片段长度多态性,并用于间接基因诊断.位于FⅧ基因外和基因内紧密连锁的VNTR位点 S52常用于分析,可用TapⅠ酶切和Southern印记法检出;③短重复顺序(STR)具有较高应用价值.已发现FⅧ基因内有2个STR,1个位于内含子13内,另1个位于内含子22中.

RFLP有很大实用性,也存在局限性.有时需要直接基因诊断.基因顺序直接测定可直接检测致病基因,对血友病做出最准确诊断,并对分子发病机制的研究提供依据,目前主要用变性梯度凝胶电泳(DGGE)和单链构象多态性分析(SSCP)结合顺序分析进行直接基因诊断.

根据病情、临床表现、症状、体征选择心电图、B超、X线、CT、MRI、生化等检查.

血友病甲的鉴别诊断1.经典的血友病甲需要与血管性血友病(von Willebrand’s disease,vWD)相鉴别 vWD的发生与FVⅢ在体内的载体von Willebrand因子(vWF)缺乏有关.因此,在vWD中FⅧ的水平也下降,虽然下降的幅度在不同的患者中可能有较大的差异.在vWD的患者中,FVⅢ的合成虽然是正常的,但是,由于它的载体vWF水平下降而在体内的半衰期缩短.将vWD与血友病甲鉴别开来的其他表现有出血时间延长、vWF抗原水平下降、瑞斯托霉素诱导的血小板聚集下降等.

2.与其他造成APTT延长的遗传性凝血因子缺乏性疾病相鉴别 如凝血因子Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ,激肽释放酶原,高分子量激肽原的缺乏等.只有因子Ⅷ缺乏和因子Ⅸ缺乏的病例表现有X连锁遗传的特点,并且也只有这两种因子缺乏会累及关节,造成残疾.血友病甲只有通过特异的检查才能与血友病乙鉴别开来.男性或女性都可发生因子Ⅺ缺乏,而且与经典的血友病相比,出血较轻.

3.由于FⅫ、激肽释放酶原、高分子量激肽原的缺乏不会造成临床出血的表现,因此,很容易与经典的血友病相鉴别.轻型的血友病(FⅧ水平大约为正常的15%)必须考虑到有因子Ⅴ与因子Ⅷ联合缺乏的情况,虽然APTT和PT都可能有轻微的延长,但是,除非考虑到这种联合缺乏,否则常常得不到正确的诊断.

4.获得性因子Ⅷ缺乏(获得性血友病甲)多由于血液中有抗FⅧ抗体存在所致,其出血的临床表现与血友病甲基本相同,但是,出血程度往往较重.本病可发生于以往健康者、女性(尤其妊娠期)、老年人,以及某些免疫性疾病患者.实验室检查方面,APTT和S-CT延长,且等量正常血浆不能纠正STGT或BTGT的缺乏,检测抑制物(抗FⅧ抗体)滴度增高,对鉴别更为准确.临床常用Bethesda方法检测.

5.血友病甲导致的出血和血肿等症状在诊断未明确时还可能与其他一些疾病相混淆,如将深部血肿误认为化脓性病灶而施行切开引流;髂腰肌出血误为阑尾炎;将腹膜后血肿误诊为阑尾脓肿;将血友病甲关节出血误为结核、关节炎和肉瘤等.将血友病引起的出血或血肿误为肾肿瘤、肺部疾患、消化道溃疡,腹腔内出血当作溃疡穿孔、肠梗阻等均有报道.