B淋巴细胞表面标志

(1)取肝素抗凝血2ml，加等量Hank液混匀，重层于分层液上，2000r/min，离心20min。取出淋巴细胞层，加Hank液，洗3次，1200r/min，离心10min，调整淋巴细胞浓度为1×107/ml，取0.1ml分装两管。

(2)将淋巴细胞悬液再用Hank液洗1次，弃去上清，用滤纸吸去管内壁剩余液体，分别加兔抗人IgG及抗人IgM荧光抗体2滴(约0.08ml)，轻摇后，放37℃温箱30min。

(3)从温箱取出用Hank液洗两次，1000r/min离心10min，小心吸去全部上清，将管底沉淀的细胞加入50% PBS缓冲甘油1滴，混匀后取1滴加入载玻片上，覆以盖玻片，置荧光显微镜下观察。