儿茶酚胺

高效液相色谱法

(1)收集24h尿液:集尿瓶中预加浓盐酸5ml作防腐剂,记下尿液总量. (2)水解:将尿液50ml置于100ml三角瓶中,加稀硫酸调节pH值至2.0.将尿样煮沸1min,用冷水冷却. (3)吸附与洗脱:上述三角瓶中加入活性氧化铝3g,用5mol/L氢氧化钠粗调pH值至近中性,再用0.5mol/L氢氧化钠细调pH值至8.2～8.4,摇匀5min.静置2min后,倾去上层清液.然后将瓶内氧化铝混悬液倾入柱层析管中(管底填有玻璃丝或砂心,管径10mm).滤干后,以0.2mol/L乙酸钠溶液10ml左右清洗1次、重蒸水洗2次,每次2ml左右.滤干后,用0.2mol/L乙酸溶液50ml左右进行洗脱,收集洗脱液,测定体积后用洗脱液加至50ml. (4)正丁醇处理:加正丁醇20ml至上述洗脱液中,倒转振摇2min.静置片刻待溶液澄清后,吸去上面正丁醇,得澄清洗脱液. (5)取15×150mm试管3支标明测定管(U)、标准管(S)和空白管(B).