沙眼衣原体

1∶8(补体结合试验CF).

(1)补体和溶血素的滴定. ①取补体1ml,加BBS 9ml,依次稀释成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同时取50%的溶血素0.2ml,加BBS 9.8ml,即为1∶100的溶血素,然后继续稀释成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400. ②采取方阵排列试管,纵行各管加不同浓度的补体0.1ml,横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后,各管加BBS 0.2ml,补体和溶血素对照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml.各管总量为0.5ml,摇匀,放37℃水箱中30min,观察结果. 以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位.上表(表1)中溶血素1∶3200为一个溶血素单位,补体1∶80为一个补体单位.在实际应用时,溶血素用2u(3200÷2=1600),补体用2.5u(80÷2.5=32). (2)正式试验: ①用V型微量反应板操作,每份标本作一个试验孔,一个血清对照孔.各孔内先加BBS 0.025ml. ②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋转后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2～1∶256稀释. ③按下表(表2))加入各试剂: (3)结果判断:凡对照组各管的结果应符合以下情况,否则应重做. 补体对照管:2.5u=0,1u=0～±,0.5u=3～4.羊红细胞对照管:4.抗体对照管:0.阴性对照管;1∶2～1∶256=0.阳性对照管:同一份阳性血清,每次结果应一致. 当各测定管反应最强一管仍为±报告可疑,1～4报告阳性.如测定管和血清对照管均抗补体,全部测定管皆为0,报告阴性. 检查抗体的方法与检查抗原的方法一样,只是改用4个单位已知抗原,藉以测定被检血清.