全血细胞计数

1、制备细胞悬液 对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程).如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物制备成细胞悬液. 1) 终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次. 2) 给培养瓶内加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化3～5min .期间不断在镜下观察.当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液. 3) 加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液. 2、计数与计算过程 1) 在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片. 3) 置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数.