荧光法密螺旋体抗体吸附试验

阴性.

(1)用吸收剂对业经56℃水浴30min灭活的被检血清作1∶5稀释,充分混匀. (2)加0.03ml分别用PBS和吸收剂作1∶5稀释过的非特异性控制血清于固着抗原螺旋体的玻片反应圈内.此为阴性对照. (3)加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的最小反应性()控制血清于玻片反应圈内.此为阳性对照. (4)加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的被检血清于玻片反应圈内. (5)将此玻片置于湿盒内,36℃±1℃,保温30min. (6)将玻片置于玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)冲淋玻片5s,然后浸入此PBS中5min.再拎出、浸没玻片,濯洗30次. (7)用业经120℃ 15min消毒的蒸馏水冲淋5min.用吸水纸轻轻将玻片吸干. (8)加0.03ml异硫氰酸荧光素标记的抗人IgG(FITC-标记抗人IgG)于每个反应圈内.重复5～7步骤. (9)加固定液1小滴于玻片上,再复上盖玻片,切勿形成气泡. (10)将玻片置荧光显微镜下,先用钨灯为光源,在暗视野下寻找Nichols螺旋体.然后改用高压汞灯,经滤光片选取紫外光段即可观看荧光结果.读片应在4h内完成.