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IgM均值11.2±6.0%;IgG均值7.5±3.3%。
(1)取肝素抗凝血2ml,加等量Hank液混匀,重层于分层液上,2000r/min,离心20min。取出淋巴细胞层,加Hank液,洗3次,1200r/min,离心10min,调整淋巴细胞浓度为1×107/ml,取0.1ml分装两管。
(2)将淋巴细胞悬液再用Hank液洗1次,弃去上清,用滤纸吸去管内壁剩余液体,分别加兔抗人IgG及抗人IgM荧光抗体2滴(约0.08ml),轻摇后,放37℃温箱30min。
(3)从温箱取出用Hank液洗两次,1000r/min离心10min,小心吸去全部上清,将管底沉淀的细胞加入50% PBS缓冲甘油1滴,混匀后取1滴加入载玻片上,覆以盖玻片,置荧光显微镜下观察。