纤溶酶

纤溶酶活性85.55%±27.83%.(发色底物法).21.1～48.9U.(刚果红显色法).

(1)硼酸缓冲液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸馏水500ml,0.1mmol/L NaOH溶液53ml,加蒸馏水至1000ml. (2)1g/L刚果红溶液:刚果红0.5g加生理盐水500ml. (3)1mol/L HCl溶液. (4)50g/L CaCl2溶液. (5)基质粉制备:血浆与生理盐水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混匀,37℃水浴60min,用玻棒将纤维蛋白全部卷出,用生理盐水洗涤两次后,挤干,置56℃温箱中烘干备用.取10g纤维蛋白,加1g/L刚果红溶液100ml,37℃水浴中不断搅拌,保温30min,3000r/min离心10min,弃去上清液,用pH7.8硼酸缓冲液反复洗涤至上清无色为止,将与刚果红结合的纤维蛋白置56℃温箱烘干备用. (6)分光光度计. 操作方法:离心上述溶液,取上清,分光光度计600nm波长比色,空白调0,测其吸光度值,查标准曲线即可得出纤溶酶活性.