尿17-酮类固醇

(1)在盛尿容器内加浓盐酸5ml作防腐剂.收集24h尿液,混匀,并量取总量. (2)取尿样5ml,放入20mm×150mm试管中,加浓盐酸15ml;在沸水浴中煮沸20min,取出,置冷水中冷却. (3)冷却尿样移入30ml小分液漏斗,加乙醚10ml,振摇2min,放置待分层后弃去下层尿液. (4)向小漏斗中加入1mol/L氢氧化钠5ml,轻摇1min,洗乙醚,放置澄清,弃去下层水相. (5)再用蒸馏水2.5ml,轻摇洗乙醚1min,放置澄清,弃去下层水相. (6)将乙醚移入15ml试管中,于40～45℃水浴中蒸干,此管即为测定管. (7)设测定管、标准管(内含雄性酮标准0.01mg)、空白管, 将各管混匀,同时在1000r/min离心2min,取上层溶液移入10mm光径比色杯中.520nm波长,以空白调零,读取各管的吸光度.