5-羟色胺

(1)膜受体制备: ①脑匀浆:大鼠或小鼠断头放血,将头剪下置冰浴中,并用骨剪剪开头颅立即取出大脑,除去包膜及残血,剪碎后加入相当重量20倍体积的预冷的溶液①,用内切式高速分散器匀浆10000r/min,1min,再用超声波粉碎器匀浆60s.全部过程在冰浴中进行. ②离心:脑匀浆在1000×g离心10min,除去细胞核及致密物质,用滴管小心地将上清液移至另一离心管中,再用50000×g离心10min,弃去上清液,沉淀物再用溶液①洗涤离心2次.最后所得的沉淀物为含受体的细胞膜碎片.全部操作都在0～4℃进行. ③悬液:沉淀物用溶液②悬浮,再用超声波粉碎器匀浆60s.然后用溶液②配成每毫升悬浮液中含脑组织湿重11.76mg.取0.2ml按lowry法测定其蛋白含量.放冰浴中备用. (2)结合反应 反应总体积为2ml,试管分二部分,一部分为总结合反应管,另一部分非特异性结合反应管.