脑脊液的显微镜检查

1正常人脑脊液中有少量的白细胞,无红细胞.细胞数为成人(0~8)×106/L儿童(0~15)×106/L.2脑脊液中细胞多为大单核细胞和淋巴细胞,两者之比约为37,偶见内皮细胞.

主要分五项检查: 一、 细胞总数 1、直接计数法适用于脑脊液标本比较清亮或微混.用滴管吸取已混匀的脑脊液标本少许,直接滴入细胞计数板,充入计数池内,静置2~3分钟,低倍镜下计数两个池内的四角和中央大格共10个大格内的细胞数,即为1μl脑脊液中的细胞总数(红、白细胞总数).在书写报告时,再换算成每升脑脊液中的细胞总数. 2、稀释计数法适用于如果脑脊液的细胞过多、混浊或带血的脑脊液.可用血红蛋白毛细吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入有红细胞稀释液 0.38μl的小试管中,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个大方格的细胞总数,乘以50,即为每微升脑脊液的细胞总数,最后换算成每升脑脊液的细胞总数报告. 二、白细胞计数 1、直接计数:非血性标本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁仅附着少许冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混匀的脑脊液标本,数分钟后红细胞就会完全溶解,再滴入计数池内,按上法计数. 2、稀释计数 :如白细胞过多,可用白细胞稀释液稀释后,按上法计数,注意计数结果应乘以稀释倍数. 3、血性标本的校正计数 混有血液的脑脊液标本混匀后,用1%的冰乙酸溶液稀释后仍按上法计数.为了剔除因出血而带来的白细胞,可用下式进行校正.每微升CSF内白细胞校正数=每微升CSF未校正的白细胞数- 三、白细胞分类计数 1、直接分类法:在白细胞直接计数后,转高倍镜观察,依据细胞形状和细胞核的形态进行分类,共计数白细胞和内皮细胞100个,分别计算单个核细胞和中性粒细胞所占的比例,以百分数表示.如白细胞总数不足100个,则直接写出单个核细胞和中性粒细胞的具体数字.如白细胞总数在30以下,可不做直接分类计数或改用染色分类计数. 2、染色分类法:脑脊液标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜,置室温或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油镜下进行分类计数.以百分比表示之. 四、病原体形态学检查 1、细菌 临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时,应做细菌学涂片检查.操作如下: (1)脑脊液标本2~3ml,以3000rpm离心15分钟,去上清液,将沉淀物涂在洁净玻璃片上,共制片2张,涂片自然或在37℃温箱中干燥固定,且勿用火焰固定. (2)涂片固定后,一张用亚甲蓝染色,另一张用革兰氏染色. (3)革兰氏染色涂片用于检查肺炎双球菌、流感杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、链球菌、大肠杆菌等,亚