血清补体C3

(1)单向免疫扩散法: ①浇琼脂板时注意避免产生气泡. ②稀释血清、抗血清所使用的吸量管必须固定.稀释参考血清和患者血清皆用统一校正过的吸管,否则要用同一根吸管.其他器材也最好统一. ③所用琼脂浓度一定要严格控制,分装后防止干燥,不要反复溶解.溶解时不要煮沸时间过长,以防水份蒸发.56℃温度要严格,太热会破坏血清,太冷易凝固.混合要迅速、充分. ④加好血清后放的位置一定要保持水平,以防扩散圈变形. ⑤受检者血清须新鲜.如条件不许可,可将血清冰冻保存或稀释后保存,数天之内影响不大,时间久后易使C3值增高. (2)火箭免疫电泳法: ①试验前首先要找出合适的抗血清浓度,使沉淀峰高度适中,峰形清晰.做法是用参考标准物稀释几个浓度做实验,使峰高确定在一定范围(2～5cm).以满意的峰高峰形将抗血清浓度确定下来.在此基础上,再用参考标准物稀释各种浓度作为抗原进行测定,以选择出最适血清标本稀释度,即选出其测定结果基本上与参考标准物含量一致的稀释度,作为血清标本的最适稀释度. ②测定补体蛋白时,血清分离后应立即使用. ③抗原用戊二醛醛化,在C3电泳中可促进负离子的泳动. ④PEG可抑制免疫复合物解离,促进免疫复合物进一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀,有助于提高试验的灵敏度. ⑤本法灵敏度为5.65μg/ml,CV为1%. ⑥其他同单向火箭免疫电泳.