血乳酸

(1)全血乳酸测定(分光光度法): ①应在空腹及休息状态下抽血.不用止血带,不可用力握拳.如用止血带,应在穿刺后除去止血带2min后再抽血.最好用肝素化的注射器抽血,抽取后立即注入预先称量的含冰冷蛋白沉淀剂的试管中.如用血浆测定,每毫升血用10mg氟化钠及2mg草酸钾抗凝,立即冷却标本,并在15min内离心. 抽血前试管编号,称重(Wt)并记录.加入6ml MPA(50g/L),再称重(Wm)后放入冰浴中,每份标本最好作双管分析.抽血后,立即注入上述试管中,每管2ml.颠倒混合3次,不可产生气泡.待试管温度与室温平衡后,再称重(Wb).静置至少15min后,离心沉淀(400r/min,15min).上清液必须澄清.计算稀释因数D: D=Wb-Wt/Wb-Wm ②偏磷酸在水溶液易中形成多聚体(HPO3),水化成正磷酸(HPO3+H2O→H3PO4).正磷酸不沉淀蛋白质,偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃时仅能维持大约1周. ③本法线性范围达5.6mmol/L(50mg/dl). ④本法不用过氯酸作蛋白沉淀剂. ⑤一般乳酸锂未标明L-或DL-者,均为DL-型,L-型乳酸锂价格昂贵. (2)血浆乳酸测定(比色法): ①本法条件下,NBT还原生成物在反应液中十分稳定,无混浊和沉淀,吸光度久置不变. ②肝素抗凝血浆、血库ACD保养液抗凝血浆、脑脊液、尿液、胃液等均可用本法测定. ③加入蛋白质对反应及生成物溶液的稳定是必要的.同时加入蛋白质及表面活性剂,可提高灵敏度及稳定性.Brij-35和TritonX-100有同样效果.人血清白蛋白中含乳酸浓度较高,不适用.因人血清白蛋白的显色强度平均较牛血清白蛋白高1.06倍,如用牛血清白蛋白,且仅加于标准管中时,标准管吸光度须乘此数. ④无乳酸蛋白液可与缓冲液预先混合后再加入1ml,代替表2中分别加入. ⑤本法线性范围达8.0mmol/L(73mg/dl). ⑥吸光度随孵育时间延长而增加,必须准确10min.加入0.1mol/L盐酸后吸光度不变. ⑦抗凝剂用肝素-氟化钠较好(1mg肝素,6mg氟化钠可抗凝5ml血).血液抽出后,血标本管置冰浴中送检,尽快分离血浆,放冰室保存待测.草酸钾对LDH有一定抑制作用,抽血较少而草酸钾相对多时尤为明显.