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取溃疡面坏死组织进行涂片检查,如能找到真菌菌丝,或取坏死组织进行培养,而有真菌生长,是最可靠的诊断依据.采取标本方法是先滴表面麻醉剂,然后用尖头小刀片在浸润致密处刮取直径0.5毫米溃疡部坏死组织一小块,作为标本.一般先做氢氮氧化钾涂片检查,如果尚有标本可取,可同时作真菌培养.有时,一次以兔过多损伤瞳孔区角膜,切勿在溃疡深处采取标本,以防溃疡穿孔.
刮取标本时,有时已能在真菌性与细菌性之间作出初步鉴别.一般说来,真菌性溃疡面的坏死组织呈“苔垢”或“牙膏”样,质地疏松,缺少粘性;而细菌性溃疡面的坏死组织呈“胶冻”样,富于粘性.
真菌涂片法
取溃疡面坏死组织一小块置于玻片上,滴5%氢氧化钾溶液一小滴于其上,覆以盖玻片,略加轻压.用高倍显微镜检查,即可检得真菌菌丝.多者常满布视野,但少量菌丝则需仔细检查才能发现.涂片阳性,一般即可确定诊断.标本需当时检查,不能保存.
真菌培养法
取坏死组织一小块,置于固体土豆或沙氏培养基斜面上.如能同时接种在几个培养基上,则有助于提高培养阳性率.放在摄氏37度温箱内,每日观察.接种次日起即有真菌生物可能.如果一周后尚未见生长,即为阳性.培养法可以观察真菌菌落的形态、色泽,在显微镜下检查菌丝、孢子等,以鉴别菌种,保存菌种以及作药物敏感度试验.培养的阳性率一般涂片为低.
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