小儿狂犬病检查

1.血,尿常规及脑脊液

白细胞总数自(12～30)×109/L不等,中性粒细胞百分率大多在80%以上,大单核细胞百分率亦可增加,尿常规检查常可发现轻度蛋白尿,偶有透明管型,脑脊液的压力在正常范围或稍有增高,蛋白质轻度增高,细胞数稍增多,但很少超过200×106/L,主要为淋巴细胞.

2.免疫学试验

(1)血清中和抗体或荧光抗体测定:对未注射过疫苗,抗狂犬病血清或免疫球蛋白者有诊断价值,缺点是在病程第8天前不易测出,接种过疫苗的患者,如中和抗体效价超过1∶5000时,对诊断狂犬病仍有价值,因仅注射疫苗者其抗体效价较低,近来亦有采用ELISA进行抗体检测.

(2)狂犬病毒抗原检测:应用荧光抗体检查脑组织涂片,角膜印片,冷冻皮肤切片中的病毒抗原,发病前即可获得阳性结果,方法简便,数小时内可完成,且与小鼠脑内接种检查内氏小体方法有较高的符合率,因此是实际应用价值较大的一种试验,在有经验的实验室中,免疫荧光试验的可靠性可达95%以上,最近采用快速狂犬病酶链免疫吸附诊断法(rapid rabies enzyme immuno diagnosis,RREID)可用于检测脑组织中狂犬病毒抗原,只需肉眼观察或酶标仪测定结果即可,如阳性反应显示橘黄色,阴性反应则无色,甚为快速简便.

3.病毒分离

从患者脑组织,脊髓,涎腺,泪腺,肌肉,肺,肾,肾上腺,胰腺等脏器和组织虽可分离到病毒,但机会均不多,自脑脊液和唾液中则更不易分离出病毒;患者的存活时间越长,病毒的分离也越困难,分离病毒可采用组织培养或动物接种,分离出病毒后可用中和试验加以鉴定.

4.脑组织动物接种与检查

均于死后进行,动物接种为将死者脑组织制成10%混悬液接种于小鼠脑内(2～3周龄的乳鼠较成年鼠为敏感),阳性者小鼠于6～8天内出现震颤,竖毛,尾强直,麻痹等现象,10～15天内因衰竭而死亡,死亡小鼠脑组织切片中可发现内氏小体.

5.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测狂犬病毒核酸

为了能检侧大多数狂犬病毒和狂犬相关病毒,可选择狂犬病毒核蛋白基因(N)中最保守区域设计引物:N1( )(587)5’-TTTTGAGACTGCTCCTTTTTG-3’(605),N2(-)(1029)5’-CCCATATAGCATCCTAC-3’(1013),取脑组织或病毒感染细胞,先获得病毒RNA,N1引物用于合成cDNA,然后进行PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果.

以死者脑组织或咬人动物死亡后的脑组织作病理切片或压片,用Seller染色及直接免疫荧光法检查内氏小体,阳性率可达70%.

常规应做X线胸片,B超,心电图,脑CT检查.